通用封闭剂

Twist 通用封闭剂的稳定设计可最大程度提高灵活性，从而提高靶向富集工作流程的效率。它们与所有的 Twist 靶向富集组合兼容，能够提高靶向读长的捕获，不受标签序列类型的影响，跨单重和多重靶向富集工作流程，并且无论组合大小如何。Twist 通用封闭剂可以让您灵活地选择最适合您实验的接头标签设计，并且靶向富集的性能不受影响。

性能不受标签设计的影响。Twist 通用封闭剂在各种单端标签和双端标签 TruSeq 兼容接头上的靶向性能。从单个基因组来源产生单个文库（NA12878；Coriell）和 TruSeq 兼容的接头，其标签长度范围为 6 至 14 bp（不包括唯一分子标识符 [UMI] 长度）。在不存在或存在 Twist 通用封闭剂的情况下，按照生产商关于 16 小时杂交反应的建议，使用外显子组靶向富集组合 (33.1 Mb; Twist Bioscience) 进行杂交捕获，每个文库使用 500 ng gDNA。所有样本中均存在 Cot DNA。使用 NextSeq 500/550 High Output v2 试剂盒进行测序，生成 2x76 双端读长。将数据下采样至靶标大小的 150 倍，并使用 Picard Metrics 进行分析，映射质量为 20。中靶碱基百分比包括中靶和靶点附近的碱基，由公式 1 - PCT_OFF_BAIT 定义。误差线表示一个标准偏差或观测值范围；N ≥ 2。

性能不受组合大小的影响。Twist 通用封闭剂在各种组合大小中的靶向性能。单个文库由单个基因组来源 (NA12878; Coriell) 和 8 bp 双端标签 TruSeq 兼容接头生成。根据生产商的 16 小时杂交反应建议，在存在或不存在 Twist 通用封闭剂的情况下，使用各种大小的靶向富集组合（0.04 Mb 至 33.1 Mb；Twist Bioscience）和每个文库 500 ng 的 gDNA 进行杂交捕获。所有样本中均存在 Cot DNA。使用 NextSeq 500/550 High Output v2 试剂盒进行测序，生成 2x76 双端读长。将数据下采样至靶标大小的 150 倍，并使用 Picard Metrics 进行分析，映射质量为 20。中靶碱基百分比包括中靶和靶点附近的碱基，由公式 1 - PCT_OFF_BAIT 定义。误差线表示观测值范围；N=2。