放心的序列
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概述

增强酶切片段化

Twist 文库制备酶切片段化 (EF) 试剂盒 2.0 旨在帮助您更高效地开展测序流程,获得更准确的新一代测序 (NGS) 结果。与原 Twist 文库制备 EF 试剂盒 1.0 相比,此更新试剂盒有多种优势。除新的片段化和连接模块外,升级后的试剂盒现在还包括 Equinox 文库制备扩增混合物。这种热启动酶制剂在低输入体积下错误率更低*,且效率更高,因此非常适合 FFPE 等需要高效率和高产率的样本。

试剂盒工作流精简,将文库制备的各个步骤融合于单管反应之中,嵌合率低,结合 Twist 高度均一的靶向富集工作流,可以带来更优质的文库制备和测序结果。

*相对于 Twist 酶切片段化 1.0

文库制备工作流

Twist 文库制备 EF 试剂盒 2.0 包含进行末端修复、dA 加尾、接头连接和文库扩增所需的试剂。试剂盒还包含 gDNA 样本片段化所需的酶,支持不同的插入量。构建核心文库之后,可使用全长或通用接头来满足您的应用需求。

 

Twist NGS 试剂与试剂盒通用接头工作流

使用 Twist 精简您的工作流
精简您的工作流
DNA 样本起始量灵活:1 ng– 500 ng
三小时即可将 DNA 样本转化为稳定的扩增文库
单管式文库制备操作,提升效率,获得一致结果
采用 Twist 实现稳定、高产量扩增
稳定、高产量扩增
热启动酶制剂,在样本起始量较低时实现高效产出
文库制备期间可以耐受较高的 GC 含量范围 (20–80%)
与常用的聚合酶相比,错误率更低
采用 Twist 实现高均一性,并且嵌合率更低
高均一性,并且嵌合率更低
搭配 Twist 靶向富集工作流,实现高度均一的扩增
检测真嵌合体时更有把握
能从高度复杂的文库中获得一致的产出,具有良好的灵敏度和特异性
了解更多信息

从最坚硬的样本中提取大量的 NGS 数据需要整个测序流程中使用最好的试剂。

阅读我们的博客,了解 Twist 文库制备酶切片段化试剂盒 2.0 如何配制,以确保优异的文库质量,从而获得超常的 NGS 数据。

Twist 文库制备酶切片段化试剂盒 2.0

是否要寻求机械片段化?

当处理困难、降解的样本(如 FFPE)时,机械片段化可能是一种可行的选择。此外,与酶切片段化一样,优质试剂是获得优质结果的关键。了解有关我们的机械片段化文库制备试剂盒的更多信息

增强酶切片段化

Twist 文库制备酶切片段化 (EF) 试剂盒 2.0 旨在帮助您更高效地开展测序流程,获得更准确的新一代测序 (NGS) 结果。与原 Twist 文库制备 EF 试剂盒 1.0 相比,此更新试剂盒有多种优势。除新的片段化和连接模块外,升级后的试剂盒现在还包括 Equinox 文库制备扩增混合物。这种热启动酶制剂在低输入体积下错误率更低*,且效率更高,因此非常适合 FFPE 等需要高效率和高产率的样本。

试剂盒工作流精简,将文库制备的各个步骤融合于单管反应之中,嵌合率低,结合 Twist 高度均一的靶向富集工作流,可以带来更优质的文库制备和测序结果。

*相对于 Twist 酶切片段化 1.0

文库制备工作流

Twist 文库制备 EF 试剂盒 2.0 包含进行末端修复、dA 加尾、接头连接和文库扩增所需的试剂。试剂盒还包含 gDNA 样本片段化所需的酶,支持不同的插入量。构建核心文库之后,可使用全长或通用接头来满足您的应用需求。

 

Twist NGS 试剂与试剂盒通用接头工作流

了解更多信息

从最坚硬的样本中提取大量的 NGS 数据需要整个测序流程中使用最好的试剂。

阅读我们的博客,了解 Twist 文库制备酶切片段化试剂盒 2.0 如何配制,以确保优异的文库质量,从而获得超常的 NGS 数据。

Twist 文库制备酶切片段化试剂盒 2.0

使用 Twist 精简您的工作流
精简您的工作流
DNA 样本起始量灵活:1 ng– 500 ng
三小时即可将 DNA 样本转化为稳定的扩增文库
单管式文库制备操作,提升效率,获得一致结果
采用 Twist 实现稳定、高产量扩增
稳定、高产量扩增
热启动酶制剂,在样本起始量较低时实现高效产出
文库制备期间可以耐受较高的 GC 含量范围 (20–80%)
与常用的聚合酶相比,错误率更低
采用 Twist 实现高均一性,并且嵌合率更低
高均一性,并且嵌合率更低
搭配 Twist 靶向富集工作流,实现高度均一的扩增
检测真嵌合体时更有把握
能从高度复杂的文库中获得一致的产出,具有良好的灵敏度和特异性
是否要寻求机械片段化?

当处理困难、降解的样本(如 FFPE)时,机械片段化可能是一种可行的选择。此外,与酶切片段化一样,优质试剂是获得优质结果的关键。了解有关我们的机械片段化文库制备试剂盒的更多信息

数据
保持在靶

Twist 文库制备 EF 试剂盒 2.0 的在靶率与 Twist 文库制备 EF 试剂盒 1.0 的在靶率相当。这里显示了在不同杂交条件下,在靶调用的分数比较。

靶向富集使用 Twist 核心外显子组组合和 Twist 通用接头系统进行。测序使用 NextSeq® 550 或 2000 平台完成。将数据下采样至目标大小的 150 倍,并使用 Picard 指标进行分析。误差线表示复样间的标准差。

Twist 文库制备 EF 试剂盒比较
降低嵌合率,减少测序错误

在文库制备期间,尽量减少不合适的 DNA 连接或重组可将嵌合体导致的测序错误降至最低。如下图所示,与 Twist 文库制备 EF 试剂盒 1.0 相比,Twist 文库制备升级版 EF 试剂盒 2.0 可显著降低嵌合测序片段比率。且其文库制备的嵌合率与机械片段化相近。

使用 Twist 文库制备试剂盒(酶切片段化 1.0)、Twist 酶切片段化试剂盒(酶切片段化 2.0)或 Twist 文库制备试剂盒(机械片段化)生成 NGS 文库。靶向富集使用 Twist 核心外显子组组合和 Twist 通用接头系统进行。使用 NextSeq® 2000 平台完成测序。将数据向下采样至相对于靶序列大小 150 倍的覆盖度,并使用 Picard 指标 PCT_CHIMERAS 进行报告。误差线表示复样间的标准差。

PCT 嵌合体机械比较
各分析批之间性能一致

可重复的性能确保了结果的可靠程度。当实验条件保持不变时,Twist 文库制备 EF 试剂盒 2.0 可产生稳健、一致的 DNA 文库片段大小。此处显示了使用此试剂盒生成的 8 个不同 NGS 文库的电泳图谱。荧光曲线的重叠显示文库制备具有一致性,这可以在每个分析批中实现。

NGS 文库使用 Twist 文库制备 EF 试剂盒 2.0 和 Twist 通用接头系统制备而成。在 37°C 下,对 50 ng 高质量 gDNA 进行片段化处理,持续 20 分钟。运行 6 次 PCR 扩增循环。使用 Agilent DNA 7500 试剂盒分析样本,使用 Expert 2100 软件获得分析结果。

Twist 文库制备 EF 试剂盒 2.0 一致性
调节片段大小,满足您的实验需求

使用 Twist 文库制备 EF 试剂盒 2.0,仅需调整片段化时间,即可根据您的具体需求调节 DNA 文库片段大小。此处是采用不同的片段化时间获得的四个 NGS 文库的电泳图谱。

NGS 文库使用 Twist 文库制备 EF 试剂盒 2.0 和 Twist 通用接头系统制备而成。在 37°C 下,按照不同的时长对 50 ng 高质量 gDNA 进行片段化处理。运行 6 次 PCR 扩增循环。使用 Agilent DNA 7500 试剂盒分析样本,使用 Expert 2100 软件获得分析结果。

使用 Twist 调节片段大小,满足您的实验需求
改善文库扩增,尽量减少测序错误

扩增期间产生错误不可避免,但错误率应得到控制。升级版 Twist 文库制备 EF 试剂盒 2.0 包含 Equinox Master Mix,该混合液中含有高保真的热启动酶。与之前推荐和常用的聚合酶相比,Equinox Master Mix 的错误率更低,错误插入的碱基更少。这意味着它能实现更精准的扩增,从而获得可信的测序数据。

使用专有的 NGS 检测多对错配碱基中的碱基错配事件。显示的值代表所有错误插入事件的平均错误率。

使用 Twist 改善文库扩增,减少测序错误
保持在靶

Twist 文库制备 EF 试剂盒 2.0 的在靶率与 Twist 文库制备 EF 试剂盒 1.0 的在靶率相当。这里显示了在不同杂交条件下,在靶调用的分数比较。

靶向富集使用 Twist 核心外显子组组合和 Twist 通用接头系统进行。测序使用 NextSeq® 550 或 2000 平台完成。将数据下采样至目标大小的 150 倍,并使用 Picard 指标进行分析。误差线表示复样间的标准差。

Twist 文库制备 EF 试剂盒比较
降低嵌合率,减少测序错误

在文库制备期间,尽量减少不合适的 DNA 连接或重组可将嵌合体导致的测序错误降至最低。如下图所示,与 Twist 文库制备 EF 试剂盒 1.0 相比,Twist 文库制备升级版 EF 试剂盒 2.0 可显著降低嵌合测序片段比率。且其文库制备的嵌合率与机械片段化相近。

使用 Twist 文库制备试剂盒(酶切片段化 1.0)、Twist 酶切片段化试剂盒(酶切片段化 2.0)或 Twist 文库制备试剂盒(机械片段化)生成 NGS 文库。靶向富集使用 Twist 核心外显子组组合和 Twist 通用接头系统进行。使用 NextSeq® 2000 平台完成测序。将数据向下采样至相对于靶序列大小 150 倍的覆盖度,并使用 Picard 指标 PCT_CHIMERAS 进行报告。误差线表示复样间的标准差。

PCT 嵌合体机械比较
各分析批之间性能一致

可重复的性能确保了结果的可靠程度。当实验条件保持不变时,Twist 文库制备 EF 试剂盒 2.0 可产生稳健、一致的 DNA 文库片段大小。此处显示了使用此试剂盒生成的 8 个不同 NGS 文库的电泳图谱。荧光曲线的重叠显示文库制备具有一致性,这可以在每个分析批中实现。

NGS 文库使用 Twist 文库制备 EF 试剂盒 2.0 和 Twist 通用接头系统制备而成。在 37°C 下,对 50 ng 高质量 gDNA 进行片段化处理,持续 20 分钟。运行 6 次 PCR 扩增循环。使用 Agilent DNA 7500 试剂盒分析样本,使用 Expert 2100 软件获得分析结果。

Twist 文库制备 EF 试剂盒 2.0 一致性
调节片段大小,满足您的实验需求

使用 Twist 文库制备 EF 试剂盒 2.0,仅需调整片段化时间,即可根据您的具体需求调节 DNA 文库片段大小。此处是采用不同的片段化时间获得的四个 NGS 文库的电泳图谱。

NGS 文库使用 Twist 文库制备 EF 试剂盒 2.0 和 Twist 通用接头系统制备而成。在 37°C 下,按照不同的时长对 50 ng 高质量 gDNA 进行片段化处理。运行 6 次 PCR 扩增循环。使用 Agilent DNA 7500 试剂盒分析样本,使用 Expert 2100 软件获得分析结果。

使用 Twist 调节片段大小,满足您的实验需求
改善文库扩增,尽量减少测序错误

扩增期间产生错误不可避免,但错误率应得到控制。升级版 Twist 文库制备 EF 试剂盒 2.0 包含 Equinox Master Mix,该混合液中含有高保真的热启动酶。与之前推荐和常用的聚合酶相比,Equinox Master Mix 的错误率更低,错误插入的碱基更少。这意味着它能实现更精准的扩增,从而获得可信的测序数据。

使用专有的 NGS 检测多对错配碱基中的碱基错配事件。显示的值代表所有错误插入事件的平均错误率。

使用 Twist 改善文库扩增,减少测序错误
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产品库存单位 - Twist 文库制备 EF 试剂盒 2.0

104206

Twist 文库制备 EF 试剂盒 2.0,16 个样本

104207

Twist 文库制备 EF 试剂盒 2.0,96 个样本

gDNA、文库构建和扩增的酶切片段化所需的试剂、酶和纯化磁珠

产品库存单位 - Twist 文库制备 EF 试剂盒 2.0

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