测序信心之选
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概述 数据 订购 资源
概述

增强型酶切片段化

Twist 文库制备酶切片段化 (EF) 试剂盒 2.0 旨在帮助您更高效地开展测序流程,获得更准确的新一代测序 (NGS) 结果。与原 Twist 文库制备 EF 试剂盒 1.0 相比,此次更新的试剂盒具有多种优势。除新的片段化和连接模块外,升级后的试剂盒现在还包括 Equinox 文库制备扩增预混液。这种热启动酶制剂在低输入体积下错误率更低*,且效率更高,因此非常适合 FFPE 等需要高效率和高产量的样本。

该试剂盒简化的工作流程将文库制备步骤合并为一个单管反应,再加上低嵌合体率和 Twist 高度均一的靶向富集工作流程,确保您实现更高质量的文库制备,获得更可靠的测序结果。

*相对于 Twist 酶切片段化 1.0

文库制备工作流程

Twist 文库制备 EF 试剂盒 2.0 包含进行末端修复、dA 加尾、接头连接和文库扩增所需的试剂。试剂盒还包含 gDNA 样本片段化所需的酶,可以用于调节插入片段大小。构建核心文库之后,可使用全长或通用接头来满足您的应用需求。

 

Twist NGS 试剂与试剂盒通用接头工作流程

使用 Twist 简化您的工作流程
简化您的工作流程
DNA 样本起始量灵活:1 ng– 500 ng
3 小时即可将 DNA 样本转化为稳定的扩增文库
单管式文库制备操作,提高效率,获得一致结果
采用 Twist 产品实现稳定、高产量扩增
稳定、高产量扩增
热启动酶制剂,在样本起始量较低时实现高效产出
文库制备过程中 GC 含量耐受性范围高 (20%–80%)
与常用的聚合酶相比,错误率更低
采用 Twist 产品获得高均一性结果,并且嵌合率更低
高均一性,低嵌合率
搭配 Twist 靶向富集工作流程,实现高度均一的扩增
更可靠地检测实际存在的嵌合体
能从高度复杂的文库中获得一致的产出,具有良好的灵敏度和特异性
全新人类样本 ID

通过追踪全血样本确保全外显子组测序的准确性。Twist 人类样本 ID 利用已建立的 Twist 文库制备和多重 PCR 来识别并追踪样本,以防止样本混淆和错误的数据生成。

了解更多信息

了解更多信息

从极复杂的样本中获取大量的 NGS 数据需要在整个测序流程中使用最好的试剂。

阅读我们的博客,了解 Twist 文库制备酶切片段化试剂盒 2.0 如何配制,以确保优异的文库质量,从而获得超常的 NGS 数据。

Twist 文库制备酶切片段化试剂盒 2.0

需要机械片段化?

当处理复杂、降解的样本(如 FFPE)时,机械片段化可能是一种可行的选择。并且与酶切片段化一样,优质试剂是获得优质结果的关键。了解有关我们的机械片段化文库制备试剂盒的更多信息

增强型酶切片段化

Twist 文库制备酶切片段化 (EF) 试剂盒 2.0 旨在帮助您更高效地开展测序流程,获得更准确的新一代测序 (NGS) 结果。与原 Twist 文库制备 EF 试剂盒 1.0 相比,此次更新的试剂盒具有多种优势。除新的片段化和连接模块外,升级后的试剂盒现在还包括 Equinox 文库制备扩增预混液。这种热启动酶制剂在低输入体积下错误率更低*,且效率更高,因此非常适合 FFPE 等需要高效率和高产量的样本。

该试剂盒简化的工作流程将文库制备步骤合并为一个单管反应,再加上低嵌合体率和 Twist 高度均一的靶向富集工作流程,确保您实现更高质量的文库制备,获得更可靠的测序结果。

*相对于 Twist 酶切片段化 1.0

文库制备工作流程

Twist 文库制备 EF 试剂盒 2.0 包含进行末端修复、dA 加尾、接头连接和文库扩增所需的试剂。试剂盒还包含 gDNA 样本片段化所需的酶,可以用于调节插入片段大小。构建核心文库之后,可使用全长或通用接头来满足您的应用需求。

 

Twist NGS 试剂与试剂盒通用接头工作流程

全新人类样本 ID

通过追踪全血样本确保全外显子组测序的准确性。Twist 人类样本 ID 利用已建立的 Twist 文库制备和多重 PCR 来识别并追踪样本,以防止样本混淆和错误的数据生成。

了解更多信息

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从极复杂的样本中获取大量的 NGS 数据需要在整个测序流程中使用最好的试剂。

阅读我们的博客,了解 Twist 文库制备酶切片段化试剂盒 2.0 如何配制,以确保优异的文库质量,从而获得超常的 NGS 数据。

Twist 文库制备酶切片段化试剂盒 2.0

使用 Twist 简化您的工作流程
简化您的工作流程
DNA 样本起始量灵活:1 ng– 500 ng
3 小时即可将 DNA 样本转化为稳定的扩增文库
单管式文库制备操作,提高效率,获得一致结果
采用 Twist 产品实现稳定、高产量扩增
稳定、高产量扩增
热启动酶制剂,在样本起始量较低时实现高效产出
文库制备过程中 GC 含量耐受性范围高 (20%–80%)
与常用的聚合酶相比,错误率更低
采用 Twist 产品获得高均一性结果,并且嵌合率更低
高均一性,低嵌合率
搭配 Twist 靶向富集工作流程,实现高度均一的扩增
更可靠地检测实际存在的嵌合体
能从高度复杂的文库中获得一致的产出,具有良好的灵敏度和特异性
需要机械片段化?

当处理复杂、降解的样本(如 FFPE)时,机械片段化可能是一种可行的选择。并且与酶切片段化一样,优质试剂是获得优质结果的关键。了解有关我们的机械片段化文库制备试剂盒的更多信息

数据
保持中靶率

Twist 文库制备 EF 试剂盒 2.0 的中靶率与 Twist 文库制备 EF 试剂盒 1.0 的中靶率相当。这里比较了不同杂交条件下的中靶片段比例。

靶向富集使用 Twist 核心外显子组组合和 Twist 通用接头系统进行。测序使用 NextSeq® 550 或 2000 平台完成。将数据降至 150x 的靶向覆盖深度,并使用 Picard Metrics 进行分析。误差线表示重复样本间的标准差。

Twist 文库制备 EF 试剂盒比较
降低嵌合率,减少测序错误

在文库制备过程中,尽可能减少不合适的 DNA 连接或重组可以将嵌合体导致的测序错误降至最低。如图所示,与 Twist 文库制备 EF 试剂盒 1.0 相比,升级版 Twist 文库制备 EF 试剂盒 2.0 可显著降低嵌合测序片段比例。且其文库制备的嵌合率与机械片段化相近。

NGS 文库通过 Twist 酶切片段化文库制备试剂盒 1.0、Twist 酶切片段化文库制备试剂盒 2.0 或 Twist 机械片段化文库制备试剂盒生成。靶向富集使用 Twist 核心外显子组组合和 Twist 通用接头系统进行。使用 NextSeq® 2000 平台完成测序。将数据降至 150x 的靶向覆盖深度,并展示 Picard Metrics PCT_CHIMERAS 数据。误差线表示重复样本间的标准差。

PCT 嵌合体机械比较
始终如一的性能

可重复的性能确保了结果的可靠性。当实验条件保持不变时,Twist 文库制备 EF 试剂盒 2.0 可产生稳定、一致的 DNA 文库片段大小。如图所示为使用此试剂盒生成的 8 个不同 NGS 文库的电泳图。荧光曲线的重叠显示文库制备具有一致性,可以在运行之间实现。

NGS 文库使用 Twist 文库制备 EF 试剂盒 2.0 和 Twist 通用接头系统制备而成。在 37°C 下,对 50 ng 高质量 gDNA 进行片段化处理,持续 20 分钟,再进行 6 个PCR循环扩增。使用 Agilent DNA 7500 检测方法分析样本,使用 Expert 2100 软件分析结果。

Twist 文库制备 EF 试剂盒 2.0 一致性
调整片段大小,满足您的实验需求

使用 Twist 文库制备 EF 试剂盒 2.0,仅需调整片段化时间,即可根据您的具体需求调节 DNA 文库片段大小。如图所示是采用不同的片段化时间获得的 4 个 NGS 文库的电泳图。

NGS 文库使用 Twist 文库制备 EF 试剂盒 2.0 和 Twist 通用接头系统制备而成。在 37°C 下,按照不同的时长对 50 ng 高质量 gDNA 进行片段化处理,再进行 6 个 PCR 循环扩增。使用 Agilent DNA 7500 检测方法分析样本,使用 Expert 2100 软件分析结果。

使用 Twist 产品调整片段大小,满足您的实验需求
优化文库扩增,尽可能减少测序错误

扩增期间产生错误不可避免,但错误并非时常出现。升级版 Twist 文库制备 EF 试剂盒 2.0 包含 Equinox 反应预混液,其中含有高保真的热启动酶。与之前推荐和常用的聚合酶相比,Equinox 反应预混液的错误率更低,错误插入的碱基更少。这意味着它能实现更精准的扩增,从而获得值得信赖的测序数据。

采用专有的 NGS 分析方法来检测大量错配碱基对中的碱基错配事件。给出的数值代表所有错配事件的平均错误率。

使用 Twist 产品优化文库扩增,减少测序错误
保持中靶率

Twist 文库制备 EF 试剂盒 2.0 的中靶率与 Twist 文库制备 EF 试剂盒 1.0 的中靶率相当。这里比较了不同杂交条件下的中靶片段比例。

靶向富集使用 Twist 核心外显子组组合和 Twist 通用接头系统进行。测序使用 NextSeq® 550 或 2000 平台完成。将数据降至 150x 的靶向覆盖深度,并使用 Picard Metrics 进行分析。误差线表示重复样本间的标准差。

Twist 文库制备 EF 试剂盒比较
降低嵌合率,减少测序错误

在文库制备过程中,尽可能减少不合适的 DNA 连接或重组可以将嵌合体导致的测序错误降至最低。如图所示,与 Twist 文库制备 EF 试剂盒 1.0 相比,升级版 Twist 文库制备 EF 试剂盒 2.0 可显著降低嵌合测序片段比例。且其文库制备的嵌合率与机械片段化相近。

NGS 文库通过 Twist 酶切片段化文库制备试剂盒 1.0、Twist 酶切片段化文库制备试剂盒 2.0 或 Twist 机械片段化文库制备试剂盒生成。靶向富集使用 Twist 核心外显子组组合和 Twist 通用接头系统进行。使用 NextSeq® 2000 平台完成测序。将数据降至 150x 的靶向覆盖深度,并展示 Picard Metrics PCT_CHIMERAS 数据。误差线表示重复样本间的标准差。

PCT 嵌合体机械比较
始终如一的性能

可重复的性能确保了结果的可靠性。当实验条件保持不变时,Twist 文库制备 EF 试剂盒 2.0 可产生稳定、一致的 DNA 文库片段大小。如图所示为使用此试剂盒生成的 8 个不同 NGS 文库的电泳图。荧光曲线的重叠显示文库制备具有一致性,可以在运行之间实现。

NGS 文库使用 Twist 文库制备 EF 试剂盒 2.0 和 Twist 通用接头系统制备而成。在 37°C 下,对 50 ng 高质量 gDNA 进行片段化处理,持续 20 分钟,再进行 6 个PCR循环扩增。使用 Agilent DNA 7500 检测方法分析样本,使用 Expert 2100 软件分析结果。

Twist 文库制备 EF 试剂盒 2.0 一致性
调整片段大小,满足您的实验需求

使用 Twist 文库制备 EF 试剂盒 2.0,仅需调整片段化时间,即可根据您的具体需求调节 DNA 文库片段大小。如图所示是采用不同的片段化时间获得的 4 个 NGS 文库的电泳图。

NGS 文库使用 Twist 文库制备 EF 试剂盒 2.0 和 Twist 通用接头系统制备而成。在 37°C 下,按照不同的时长对 50 ng 高质量 gDNA 进行片段化处理,再进行 6 个 PCR 循环扩增。使用 Agilent DNA 7500 检测方法分析样本,使用 Expert 2100 软件分析结果。

使用 Twist 产品调整片段大小,满足您的实验需求
优化文库扩增,尽可能减少测序错误

扩增期间产生错误不可避免,但错误并非时常出现。升级版 Twist 文库制备 EF 试剂盒 2.0 包含 Equinox 反应预混液,其中含有高保真的热启动酶。与之前推荐和常用的聚合酶相比,Equinox 反应预混液的错误率更低,错误插入的碱基更少。这意味着它能实现更精准的扩增,从而获得值得信赖的测序数据。

采用专有的 NGS 分析方法来检测大量错配碱基对中的碱基错配事件。给出的数值代表所有错配事件的平均错误率。

使用 Twist 产品优化文库扩增,减少测序错误
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产品 SKU - Twist 文库制备 EF 试剂盒 2.0

104206

Twist 文库制备 EF 试剂盒 2.0,16 个样本

104207

Twist 文库制备 EF 试剂盒 2.0,96 个样本

gDNA、文库构建和扩增的酶切片段化所需的试剂、酶和纯化磁珠

产品 SKU - Twist 文库制备 EF 试剂盒 2.0

104206

Twist 文库制备 EF 试剂盒 2.0,16 个样本

104207

Twist 文库制备 EF 试剂盒 2.0,96 个样本

gDNA、文库构建和扩增的酶切片段化所需的试剂、酶和纯化磁珠

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