确保您的载体满足以下要求：

• 载体体积 ≥ 100 uL（质粒材料不得置于滤纸上提交）
• 载体浓度 ≥ 100 ng/uL
• 载体质量 10 ug
• 必须有细菌复制起点（非低拷贝）
• 必须为克隆群体
• 必须为环形
• 必须有抗生素耐药性标记
• 在插入位点的 40 bp 范围内，不得含有大于 9 bp 的均聚物/重复序列
• 重复：必须包含至少 40 bp 的独特序列，在插入位点的上游和下游无大于 19 bp 的直接或反向重复
• 最终基因产品中不得含有 ccdB
• 在插入位点 50 bp 的范围内，必须能够通过限制酶位点实现线性化
• 必须符合 BSL-1

抗生素耐药性：

质粒必须包含以下大肠杆菌抗生素耐药性标记之一标准浓度如下：

抗生素	生产中可用的标准浓度 (ug/mL)
Kan	50
AMP	100
CHLOR	25
APRA	50
SPEC	100
TET	10
ZEO	50
BLAST	100

细胞系（大肠杆菌）       

• 生产中可用的细胞系        
• 类似于 DH10Beta 的克隆株   
• 类 Stbl3 菌株（可在 37°C 下生长）        

拷贝编号              

仅允许使用结构复制起点。

Twist 定义	已接受	示例
高	是	ColE1/pMB1/pBR322/pUC
中	是，小规模制备收率下降	p15A
低	否	pSC101

生长条件     

• 标准温度：37°C/30°C   
• 标准时间：过夜/24 小时         
• 接种的菌落在 LB-Lennox 上生长 16 小时/24 小时后，必须达到自动化适用大小。